在生物樣品的制備過程中，提高樣品的質量與純度是至關重要的。免疫親和柱作為一種高效的樣品凈化技術，能夠特異性地結合并去除樣品中的雜質，從而顯著提高樣品的純度。
一、原理
基于抗原抗體特異性結合的原理設計。柱內填充有與目標分子特異性結合的抗體或抗原，當樣品通過柱子時，目標分子與相應的抗體或抗原結合，形成穩定的復合物。隨后，通過洗滌步驟去除未結合的雜質，洗脫目標分子，從而實現對樣品的凈化與富集。
二、樣品制備流程
樣品收集與預處理：先收集適量的樣品，并根據需要進行預處理，如離心、過濾等，以去除樣品中的大顆粒雜質和細胞碎片。
選型與準備：選擇與目標分子特異性結合的免疫柱，并按照說明書進行柱子的準備，包括平衡柱子、加入抗體或抗原等。
樣品上樣：將預處理后的樣品緩慢加入免疫柱中，使目標分子與柱子內的抗體或抗原充分結合。
洗滌與雜質去除：用適當的洗滌液沖洗柱子，去除未結合的雜質。洗滌過程中應注意控制流速，避免影響結合物的穩定性。
目標分子洗脫：使用適當的洗脫液將目標分子從免疫親和柱上洗脫下來。洗脫過程中同樣需要控制流速，并收集洗脫液。
樣品濃縮與保存：將洗脫后的樣品進行濃縮處理，并根據需要進行保存。
三、注意事項
選擇合適的免疫親和柱：根據目標分子的性質和純度要求選擇合適的免疫柱。不同的免疫柱對目標分子的結合能力和特異性有所不同。
控制樣品與洗滌液的流速：在樣品上樣和洗滌過程中，應控制流速，避免影響結合物的穩定性。
洗脫條件的優化：洗脫液的選擇和洗脫條件的優化對于提高樣品的純度和回收率至關重要。應根據實際情況進行調整和優化。
